冷凍超薄切片原理和使用

冷凍超薄切片技術(shù)是一種為了研究更接近于生物生活狀態(tài)結構和功能而發(fā)展起來(lái)的電鏡樣品制備技術(shù)。它是把樣品進(jìn)行冷凍固定后，進(jìn)行超薄切片，省去了經(jīng)典超薄切片法的長(cháng)時(shí)間的固定、脫水和也埋等處理。下面給大家介紹冷凍超薄切片機操作，冷凍超薄切片的制備程序可為兩類(lèi)，我們一起看看吧。

　　1.無(wú)溶液制備法：包括取材、快速冷蹤、冷凍替代

　　、切片、干燥、染色或不染色、鏡檢等幾個(gè)步驟。主要用于可溶性物質(zhì)的放射白顯影和X射線(xiàn)微區分析。

　　2.固定樣品制備法：包括取材、醛類(lèi)闌定、樣品包埋或不包埋、冷凍保護處IR、快速冷凍切片、染包及鏡檢等步驟。適用于進(jìn)行形態(tài)學(xué)、細胞化學(xué)和免疫細胞化學(xué)研究。

　　用戶(hù)經(jīng)培訓后取得資格可自行使用超薄切片機，使用步驟如下：

　　1）開(kāi)機

　　2）檢查是否處于切片模式，檢查頂光底光是否亮度正常；

　　3）將包埋塊放入適當夾頭并用六角扳手旋緊，以固定包埋塊；（然后將夾頭安裝在修快臺進(jìn)行修快）；

　　4）將夾頭放入機械臂，并用手旋好螺絲上緊夾頭（不可用六角扳手）；

　　5）將玻璃刀/鉆石刀安裝在刀臺上，用手旋好螺絲以固定刀，并注意檢查刀臺是否固定于底座上；

　　6）檢查刀間隙角，調整刀臺角，選擇適當的夾頭角度等；

　　7）設定切片窗口（上下范圍）；

　　8）對刀；

　　9）選擇所用切片速度和厚度；

　　10） 在刀槽內注水，注意水面平整；

　　11） 切片、撈片；

　　12） 關(guān)機、清理切片機，拿走個(gè)人物品，保持切片臺面整潔；

　　13） 登記使用記錄。