—— PROUCTS LIST
玻璃制刀機介紹——用于電子顯微鏡和光學(xué)顯微鏡
超薄切片機需要使用玻璃刀，為電鏡和光鏡提供超薄樣本切片。
對于樹(shù)脂切片和冷凍切片（Tokuyasu樣本）的玻璃刀，其刀鋒必須非常鋒利、堅固、穩定。采用斷裂法制備優(yōu)質(zhì)玻璃刀時(shí)，玻璃條的質(zhì)量非常重要。玻璃條由精選玻璃生產(chǎn)而成，厚度和質(zhì)量均經(jīng)過(guò)精確把控。只有采用高質(zhì)量標準來(lái)嚴格把控公差，才能從一塊玻璃中制出兩把優(yōu)質(zhì)玻璃刀。
圖1：成刀
平衡斷裂概念
在科學(xué)級質(zhì)量的玻璃條中制造受控的筆直斷裂，要求制刀機在劃痕的兩側施加相同的重量和壓力。此外，從底部接觸玻璃的支撐元件必須盡可能減小表面接觸，以免在斷裂之前對玻璃施加非受控的壓力。
采用平衡斷裂法（圖2）制刀時(shí)，一根玻璃條會(huì )從中間劃痕處斷裂成相等的兩半。劃痕兩側的玻璃重量相等，斷裂是平衡的，新產(chǎn)生的斷裂面是平整的。不斷將新產(chǎn)生的玻璃條斷成相等的兩半，可以得到一定數量的方形玻璃板。
所有方形玻璃板都擁有平直的側邊以及精準的直角，而連續斷裂法得到的方形玻璃板的表面常常會(huì )彎曲變形。
圖2：平衡斷裂法
劃痕和斷裂原理
制作高質(zhì)量玻璃刀通常需要制作出一批相等的方形玻璃板，在玻璃上精確地劃出劃痕，精確地施加壓力，使其斷裂。
通常情況下，當斷裂發(fā)生在靠近拐角的地方（長(cháng)劃痕）時(shí)，刀鋒更加平直，對面刀肩更窄。過(guò)去建議使用短劃痕制作冷凍超薄切片，因為這樣一來(lái)自由斷裂的時(shí)間較長(cháng)，可以制得最鋒利、最長(cháng)的可用刀鋒[1, 2]。
每個(gè)劃痕已經(jīng)預設好，劃痕距離方塊兩個(gè)角的距離相等。斷裂發(fā)生時(shí)，玻璃下方墊著(zhù)兩枚不銹鋼半球，上方則由兩枚斷裂銷(xiāo)固定。這種斷裂可以讓劃痕向其兩側盡可能地延伸，直至自由斷裂發(fā)生。自由斷裂的方向由斷裂兩側玻璃的重量以及兩側施加的力決定
自由斷裂向方形玻璃板的邊緣彎曲，最終制得一把刀，且刀鋒對面出現平邊（刀肩）（圖3a）。若劃痕沿著(zhù)方塊的中心延伸，則產(chǎn)生的刀肩會(huì )非常窄，此時(shí)刀的角度更加接近45°（圖3b）。
這是冷凍超薄切片的優(yōu)選設置。進(jìn)行樹(shù)脂切片時(shí)，則可以將刀肩設置得稍微大一些（~0.5 mm），產(chǎn)生更大的刀角度，這樣能更加穩定。
圖3a
圖3b
玻璃刀真實(shí)刀角度
在方形玻璃板上劃出劃痕時(shí)，所有劃痕距離方形玻璃板直角還有一定距離。對劃痕兩側施加壓力，斷裂開(kāi)始，首先可以看到劃痕開(kāi)始變深。斷裂沿著(zhù)劃痕向方形玻璃板兩角延伸。劃痕到達兩個(gè)角后，自由斷裂開(kāi)始。斷裂沿著(zhù)劃痕延伸，到達兩角時(shí)向方形玻璃板的一邊偏離彎曲。因此，玻璃刀的真實(shí)刀角會(huì )略大于劃痕角度。
玻璃刀的真實(shí)角度會(huì )隨著(zhù)劃痕偏離對角線(xiàn)角度的增大而增大。這種情況下，刀肩就會(huì )變寬。
例如，用方形玻璃板制作玻璃刀時(shí)，若刀肩較?。?lt;0.5>0.5 mm）后，會(huì )進(jìn)一步放大真實(shí)刀角度，甚至可能使其大于55°（圖4）。
圖4
可用刀鋒長(cháng)度
在暗場(chǎng)照明下用體式鏡來(lái)檢查玻璃刀刀鋒（或用超薄切片機并使用背光燈照明），可以看出刀鋒的中間部分zui shi he用來(lái)做超薄切片。刀鋒右側有可見(jiàn)的毛刺（鋸齒狀），會(huì )使刀的質(zhì)量下降。受應力線(xiàn)影響，刀鋒左側也不適合做切片（圖5）。
從應力線(xiàn)離開(kāi)刀鋒到刀鋒出現毛刺（鋸齒狀），這一段刀鋒可用做超薄切片。
圖5
注 意
使用8 mm玻璃條比使用6.4 mm玻璃條多30%可用刀鋒長(cháng)度！
方形玻璃板斷裂成玻璃刀時(shí)，施加的力越小，應力線(xiàn)就會(huì )越快離開(kāi)刀鋒，鋸齒狀毛刺也更少。這樣一來(lái)，可用刀鋒長(cháng)度就會(huì )更長(cháng)。
檢查刀鋒
制得一對玻璃刀后，可以在超薄切片機上檢查刀鋒質(zhì)量。
使用背光燈照明，將間隙角設置為最大值，可以看見(jiàn)一道非常細的白線(xiàn)（圖6）。這條線(xiàn)可用于判斷刀鋒的質(zhì)量，白線(xiàn)必須平直、無(wú)塵、無(wú)油漬、無(wú)指紋、無(wú)玻璃毛刺。
另外，也可以使用頂燈照明觀(guān)察玻璃刀的刀鋒質(zhì)量（圖7）。
圖8所示玻璃刀質(zhì)量不合格，不能使用。抓取玻璃刀時(shí)，指紋留在了刀鋒上。
圖9（頂部）展示了一對玻璃刀，它們在斷裂后并排放置。圖中（圖9底部）還展示了兩把玻璃刀的刀肩細節。在斷裂過(guò)程中，右側刀鋒與左側刀肩對應，左側刀鋒與右側刀肩對應。
圖6
圖7
圖8
圖9
參考資料：
1. Griffiths G, Simons K, Warren G and?Tokuyasu KT:?Immunoelectron microscopy using thin, frozen sections: Application to studies of the intracellular transport of Semliki Forest virus spike glycoproteins. In: Methods in Enzymology?466–485 (1983).
2. Tokuyasu KT: Application of cryoultramicrotomy to immunocytochemistry. Journal of Microscopy 143 (2): 139–149 (1986).
